STED-Mikroskop

http://de.wikipedia.org/wiki/Stimulated_Emission_Depletion_Microscope

Ein STED-Mikroskop (STED = Stimulated Emission Depletion) ist ein Fluoreszenzmikroskop, dessen Auflösung nicht beugungsbegrenzt ist und das nach dem RESOLFT-Prinzip arbeitet.

Aufgrund von Beugung ist die Auflösung herkömmlicher Fernfeldmikroskope begrenzt. Es lassen sich daher keine Details auflösen, die kleiner als circa die halbe Wellenlänge des verwendeten Lichts sind. Konfokalmikroskope können daher nebeneinanderliegende Strukturen nur bis zu einer Größe von ca. 200 nm auflösen. Die Auflösung für hintereinanderliegende Objekte (Tiefenauflösung) ist deutlich schlechter. Beim STED-Mikroskop wird durch gezieltes Ausschalten von Fluoreszenzfarbstoffen die Auflösung über die Beugungsgrenze hinaus gesteigert. Es konnte bereits eine Auflösung von 5,8 nm (lateral) gezeigt werden.

Vergleich von Standard-Konfokalmikroskopie (grüne Bilder, links) und STED-Mikroskopie (violette Bilder, Mitte) bei der Abbildung von DNA Replication factories, Protein-Komplexen zur DNA-Replikation, im Zellkern menschlicher Zellen. Die durch Überlagerung der Konfokal- und der STED-Aufnahmen erstellten Bilder (rechts) sowie die Ausschnitte (kleine graue Bilder) verdeutlichen die höhere Auflösung der STED-Mikroskopie.